冰凍切片的種類有很多，隨著科技的發展，許多方法已經被時代遺忘。如今，低溫恒冷箱冰凍切片法被普遍采納，服務于病理科的急診工作。冰凍切片利用物理降溫的原理，將新鮮的組織在低溫恒冷切片機冷凍后變硬馬上進行切片，適用于快速切片法。在對患者實施手術過程中，臨床醫師取出的病變組織需要病理醫師快速診斷從而來確定病變性質，可為決定手術方案、范圍及治療方法提供指導。因此，只有高質量的冰凍切片，才能保證病理診斷的準確性，現將其制作體會介紹如下。

1 取材及包埋

手術中的新鮮組織應不加固定液，送到病理科后立即取材。所取的組織應有針對性，盡量保持組織的原有形態，避開壞死組織、脂肪、骨組織，并且縫線、鈣化區要剔除。取材過程中組織不能接觸水，當組織中含水量高時，用干紗布吸干后再進行冷凍，以防冰晶形成，取材厚度是 0.2 cm~0.3 cm,大小為1.0 cm~1.5 cm.將取好的組織塊立即放在冷凍托上，加膠水覆蓋組織塊。當組織較小或較薄時，可先在冷凍托上做一小凍臺，將組織放在冷凍托的中央位置，再加少量膠水于組織上，稍凍后用冷凍錘壓平，再進行切片，這樣方能切出完整的片子。

2 切片

我科用的是 LeicaCm1950 冰凍切片機，平常工作中，冰凍切片機長期處于待機備用狀態，可將箱體溫度、凍頭溫度設定為 -20℃左右。當然，不同的組織要求的溫度也不同，要根據情況區別對待，隨時調整。例如細胞多的組織及腫瘤，溫度就要求是 -20℃；含脂肪較多的組織則要 -35℃冷凍，并且要冷凍 2min~3 min,直到看到包埋劑發白變硬后再進行切片（用羽毛牌 C-35一次性刀片，只用于冰凍切片機）。切片的準備工作應提前做好，可以節省時間。一切準備就緒，開始切片，首先進行組織的粗修，粗修的厚度是 45 μm~50 μm,粗修到暴露組織的最大平面。值得注意的是，修片時要觀察重點病變的微小病灶，防止因為沒有切到位而發生漏診。粗修后要用毛筆清除機頭標本托及切片機上的組織碎屑，防止交叉污染。然后再以轉動大輪推進的方式進行切片，切片時用力要均勻，動作要輕柔，切成厚度是 4 μm~6μm,完整、平坦、無褶的薄片，直接附貼在干凈的載玻片上。

3 固定、染色

切片完成后，要立即放在固定液中，不能等切片晾干后固定，否則易發生細胞退變，使細胞核著色不佳，染色質不清晰而影響診斷，我科使用的固定液是 95%酒精。固定 1 min 后進行染色，隨后自來水清洗，再蘇木素滴染加溫（酒精燈加溫），1%鹽酸酒精分化，水洗后飽和碳酸鋰返藍，伊紅染色 3 s~5 s,從低濃度到高濃度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。這樣，一張高質量的冰凍切片就完成了。

冰凍切片的質量受多方面因素的影響，要求技術員具備高度的責任心和嚴謹的工作態度，嚴格按照規范操作并不斷總結和改進，以提高切片質量，更好地為臨床服務。