急性濕疹一般是由多種內外因素引起的一種常見的、具有明顯滲出傾向的皮膚炎癥反應，臨床一般以丘皰疹為主。在中醫學里有“濕瘡”、“繡球瘡”、“浸淫瘡”之稱，且好發于顏面、手足、前臂、小腿、外陰等處，彌散成片，邊緣不清，瘙癢劇烈，抓騷、摩擦等物理刺激可造成滲出結痂及片狀糜爛。急性者以濕熱為主，中醫辨證多為濕熱浸淫證，由此可知，清熱、祛風、祛濕是急性濕疹治療的三大原則。目前，該病的治療多采用西醫抗過敏療法，但其存在一定的不良反應。近年來發現，利用中醫傳統驗方治療急性濕疹有獨特的臨床價值。

川芎茶調散是治療頭痛的常用方劑，在現代臨床中具有解熱鎮痛抗炎的作用，對治療蕁麻疹、風濕性關節炎、過敏性鼻炎等過敏性疾病亦有一定療效，但其在治療急性濕疹方面研究尚為數不多。通過對該方藥理及配伍關系進行研究，初步推斷其可用于治療濕疹。本研究通過設計急性濕疹動物模型，測定細胞因子的改變，初步探討了川芎茶調散在濕疹治療中的作用。

課題組前期已經對該藥物的其他免疫指標做了初步研究，證實了川芎茶調散能降低小鼠耳腫脹度，提高胸腺、脾指數，升高降鈣素基因相關肽（CGRP）濃度，在此基礎上，課題組進一步深入研究了 IL-2、IgE 及 NO 等相關分子的水平及其作用機制。

1、 材料和方法

1.1 動物：本校教學實驗中心提供的健康成年（13 周齡）昆明系小鼠75 只，體重 25～30g。

1.2 試劑：硫化鈉；2，4-二硝基氟苯（濃度、配制方法同文獻）；IL-2試劑盒；IgE 試劑及抗體；水合氯醛；甲醛；Griess 試劑，按參考文獻自行配制；小鼠 IL-2 檢測試劑盒和 IgE 檢測試劑盒，購自上海晨易生物科技有限公司。

1.3 藥品：川芎茶調散由薄荷葉 12g、川芎 9g、荊芥 9g、細辛 3g、防風4.5g、白芷 6g、羌活 6g、炙甘草 6g、茶葉 15g 組成，購自漱玉平民大藥房。實驗前用蒸餾水按照 3∶2∶1 的比例將其配成高、中、低三種濃度（其中，高濃度組：0.5g/ml，中濃度組：0.25g/ml，低濃度組：0.125g/ml），37℃下超聲 40min 促進溶解。

1.4 主要器材：多功能自動酶標分析儀；精密天平；醫用超聲波清洗器；低速離心機；37℃電熱恒溫鼓風干燥箱等。

2、 實驗步驟

2.1 動物分組：將 75 只小鼠隨機分為 5 組，每組 15 只，即空白組、模型組、川芎茶調散高濃度組、川芎茶調散中濃度組和川芎茶調散低濃度組。

2.2 模型制備：參照文獻方法，將上述五組實驗小鼠除空白組外腹腔注射麻醉，腹部脫毛后，實驗當天以 0.5%二硝基氯苯溶液涂于小鼠的腹部致敏，同時，左耳涂等量丙酮做基質對照。d2 強化一次，6d后在小鼠右耳內側外涂0.2%二硝基氯苯激發，24h后處死小鼠。

2.3 治療給藥：觀察造模成功后當天，除空白組和模型組以外，其他各組在致敏后 2h 開始用藥，持續用藥 7d，1 次/d。

2.4 檢測指標：小鼠用藥結束后，檢測其血清 IL-2、IgE 和 NO 濃度。

2.4.1 血清 IL-2 的測定：按照文獻。

進行。小鼠經眼球摘除取血 lml，1500r/min 離心 20min，取出血清置于微量離心管內，-80℃冰箱保存備用，采用 ELISA 法測定血清 IL-2，步驟按 IL-2 試劑盒說明進行。

2.4.2 血清 IgE 濃度測定：參考文獻。采用 ELISA 法，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行，所有標本均在同一批次內檢測完成。

2.4.3 血清 NO 濃度測定：以 Griess 法檢測血清中 NO2-水平，以反映血清中NO含量。按文獻進行操作，擬合NO反應標準曲線，計算結果。

2.5 統計學方法：實驗數據以（x±s）表示，采用 SPSS 17.0 統計軟件進行單因素方差分析，設置檢驗水準 α=0.05，以 P<0.05 為差異有顯著性。

3、 結 果

各組小鼠血清 IL-2、IgE 及 NO 濃度測定結果如表 1 所示。

由表 1 可見，造模組與空白組相比，血清 IL-2、IgE 及 NO 水平均有顯著差異（P<0.05），提示造模成功。川芎茶調散各用藥組小鼠血清 IL-2、IgE 及 NO 水平明顯降低，且與模型組相比有顯著性差異（P<0.05），證明應用川穹茶調散進行治療有較好效果。

4、 討 論

在現代臨床中，川芎茶調散主要用于治療感冒頭痛、偏頭痛、血管神經性頭痛、慢性鼻炎頭痛等，而極少應用于濕疹的治療?，F代醫學研究發現，方中成分有抗炎、抗過敏、止痛消腫等作用，對外感風邪所致的過敏性疾病亦有獨特的作用。

川芎茶調散對急性濕疹的作用機制可能是通過調節細胞因子來實現的，其調節機制復雜。急性濕疹是由內外激發因子引起的一種遲發型超敏反應，類似于變應性接觸性皮炎。變應性接觸性皮炎是 T 細胞介導的遲發型超敏反應。研究表明，Th1/Th2 失衡是超敏反應性疾病發病中的一個重要環節或始動因素。IL-2 是 Thl 細胞及 NK 細胞分泌的重要細胞因子，有多方面免疫活性，可促進單核巨噬細胞和 NK 細胞的增生，在抗感染、抗腫瘤等細胞免疫中發揮著重要作用。但另一方面，在變應性接觸性皮炎中，IL-2 也會異常升高，導致炎癥加重。如用藥后 IL-2 水平降低，則證明該藥物可有效抑制急性濕疹發病后 IL-2 的異常增高，減輕超敏反應。IgE 是介導Ⅰ型超敏反應的主要介質，在急性濕疹中亦為重要作用物質之一。該抗體水平降低，可表明機體內 IgE 介導的超敏反應減弱。

相關研究認為，NO 在免疫應答中具有多種作用，一方面，NO是各種的生理功能和防御機制的重要參與分子；另一方面，NO 產生過多可造成多種機體損害。在炎癥反應中，NO 的含量往往有異常升高，故此調節其水平可有效影響炎癥反應。在本實驗中，用藥后血清 NO 含量明顯降低，顯示炎癥反應有所減弱。

本實驗應用 DNFB 誘導小鼠急性濕疹模型，用藥后測定血清IL-2、IgE 和 NO 水平，通過檢測相關細胞因子和分子水平變化檢測其免疫功能。實驗結果顯示，用藥后小鼠血清 IL-2、IgE 和 NO 水平均下降，與正常組相比，有顯著差異?？梢?，該藥物具有一定的抗炎、抗超敏反應、參與免疫調節的作用，有望進一步開發作為臨床治療急性濕疹的有效藥物。

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