環保型 GS 組織制備試劑套液是一種新型組織脫水液,因其不含甲醛、二甲苯等有害成分,是病理技術工作中理想的固定液、脫水液.本文就對不同組織的固定液效果進行分析,以驗證其在病理技術中的應用價值.

1 材料與方法

1. 1 材料 隨機選取我院手術室送檢的新鮮標本 20 例,其中乳腺癌 8 例、子宮內膜癌 5 例、胃癌 3 例、結腸癌 2 例、淋巴瘤和肝癌各 1 例.

1. 2 方法

1. 2. 1 組織制備 分別切取腫瘤組織及瘤旁正常組織各 6份,將其切成 2 cm ×1 cm × 0. 2 cm 大小的組織塊,放入包埋盒中,分別放入環保型 GS 組織制備試劑套液中的無醛固定液\\( 天醛組\\) 和 4%中性緩沖甲醛固定液\\( 甲醛組\\) 固定 1、3、7、15、30 和 60 天后,對照組進行常規脫水、透明、浸蠟和包埋,實驗組用環保型 GS 組織制備試劑套液進行脫水、透明、浸蠟和包埋.統一切片.

1. 2. 2 常規 HE 染色 兩組同時進行 HE 染色,采取單盲法先由 2 位初級病理醫師初步比較,最后由 2 位高級職稱病理醫師審核.

1. 2. 3 特殊染色 兩組同時對胃癌、結腸癌進行 PAS 染色,對肝癌進行 Masson 染色和網狀纖維染色,檢測程序同上.

1. 2. 4 免疫組化 兩組同時對乳腺癌、子宮內膜癌進行 PR和 ER 檢測,對乳腺癌進行 HER-2 檢測,對胃癌、結腸癌進行CK8、CK18、CDX2 和 CEA 檢測,對肝癌進行 AFP、CK8 和CK18 檢測,對淋巴瘤進行 LCA、CD20、CD79a 和 bcl-2 檢測,檢測程序同上.

1. 2. 5 SISH 銀染原位雜交檢測 兩組同時對乳腺癌進行HER2 /17 號染色體 DNA 雙探針檢測,檢測程序同上.

1. 3 統計學分析 將實驗數據輸入 SPSS16. 0 統計學軟件中進行處理.其中計數資料采用 χ2檢驗.

2 結果 見表 1.

3 討論

目前甲醛固定法在絕大部分病理科仍然作為日常工作中的固定方法.但在保持組織形態學、保存抗原性及 DNA/RNA 等方面的性能,研究顯示,環保型無醛固定液不遜色于甲醛固定液.本研究結果顯示,組織固定時間在 1 ~7 天時,無醛組和甲醛組的免疫組化染色結果差異不顯著\\( P >0. 05\\) ,但經過 60 天的固定后,甲醛組的免疫組化陽性結果明顯劣于無醛組.另外,我們還發現,無醛組固定 1 天與固定 60 天的免疫組化結果進行比較,兩組差異不顯著,說明用環保型無醛固定液固定組織至 60 天或者更長,對免疫組化染色結果影響甚微.而甲醛組固定 15 天與固定 1 天染色效果差異顯著\\( P <0. 05\\) ,說明甲醛固定液不適宜長時間固定組織,否則會導致抗原丟失,使免疫組化染色結果受到一定的影響.

無醛固定液與傳統 4% 中性緩沖甲醛固定液處理的切片效果基本相同,組織滲透能力強,固定均勻,保持良好的組織形態學結構,保護細胞膜的完整性,有較強的固定、脫水、脫脂兼顧硬化的作用,組織收縮小,無核固縮,有效地保護組織中的抗原和核酸不被破壞、降解,DNA/RNA 保存效果好.

免疫組化檢測結果顯示,陽性率和陽性強度與傳統組織制片法進行免疫組化檢測的結果相一致,甚至更優于傳統組織制片法的結果.

實驗結果顯示,采用環保型 GS 組織制備試劑套液進行組織脫水透明與傳統的方法比較,處理的組織塊軟硬適中,不會產生組織脫水過度或脫水不夠的現象,不易造成組織過度硬化,尤其對脂肪組織及較堅韌的組織處理效果較傳統制片方法更好.

環保型 GS 組織制備試劑套液是一種無色、無毒、無異味、無刺激性的環保新型組織脫水制備液,不含甲醛、二甲苯等有害成分,對人體無傷害、對環境無污染,為建立"綠色實驗室"奠定了良好的基礎.采用環保型 GS 組織制備試劑制作的石蠟切片、HE 染色、組織化學染色、免疫組化染色、分子病理檢測等完全可以替代傳統的以甲醛、二甲苯為主體制備的石蠟切片技術流程,在病理技術中的應用價值比傳統組織制備的效果要好,值得推廣應用.