S-100A4蛋白為S100鈣離子結合蛋白超家族成員之一,是由101個氨基酸組成的。S100蛋白參與調解細胞的結構、形態、增殖、信號轉導、鈣依賴信號調解及細胞骨架的組織等。不同的腫瘤組織其S100蛋白表達差異明顯,但大部分定位于染色體的1q21區域,如重疊、易位、缺失等,進而造成S-100基因的表達異常。近幾年來國內外文獻報道S-100A4蛋白在肺癌、甲狀腺癌、膀胱癌、乳腺癌等多種腫瘤中高表達,并與其臨床分期、轉移及預后關系密切。本文研究通過檢測胃癌組織和正常胃黏膜中S-100A4的表達,探討S-100A4與胃癌發生、發展的相關性,以便為胃癌患者的預后提供有效的評價指標。

1、 研究材料與方法

1.1 研究對象

收集2010年8月~2011年5月山東省千佛山醫院存檔的胃癌患者的臨床手術標本,并統計患者資料?；颊叩慕y計資料包括以下方面:患者的性別,年齡,原發腫瘤的大小,腫瘤的組織學類型,分化程度、浸潤深度,淋巴結轉移及臨床病理分期。

1.2 試劑及方法

抗S-100A4兔抗人多克隆抗體\\(0.1 mi\\)購于北京博奧森生物技術有限公司,其濃度為1B500;SP試劑盒同樣購于北京博奧森生物技術有限公司。按照SP試劑盒說明書的操作步驟,采用常規SP法檢測,以說明書中提供的陽性切片為對照,PBS代替一抗作為陰性對照,細胞核及胞漿中黃色及棕色顆粒即可認為S-100A4蛋白表達陽性,顏色為黃色,無色\\(-\\)為陰性;淺黃色\\(±\\)為弱陽性;黃色\\(+\\)為陽性;棕黃色\\(++\\)強陽性,對照組胃癌正常黏膜組織亦根據染色強度進行評分,染色結果見附圖。

1.3 統計學處理

應用SPSS 17.0 for windows對數據進行統計分析,ｘ2檢驗或作相關分析,以P<0.05為差異有統計學意義。

2、 結 果

S-100A4在胃癌組和正常胃黏膜組中的表達,見表1。S-100A4的表達與胃癌患者腫瘤相關參數的關系,見表2。

2.1 S-100A4蛋白在不同部位的表達

本試驗82例胃癌組織中有43例S-100A4蛋白表達,陽性率52.4%\\(43/82\\);82例癌旁正常組織標本中有3例S-100A4表達,其陽性率為3.6%\\(3/82\\),胃癌組織中S-100A4蛋白表達陽性率顯著高于胃癌正常黏膜,二者相比差異有統計學意義\\(P<0.05\\)。

2.2 胃癌組織中S-100A4蛋白表達與臨床病理間的關系

本實驗在對31例無淋巴結轉移的胃癌組織中,S-100A4蛋白表達5例,陽性率為16.13%\\(5/31\\),在有淋巴結轉移的51例胃癌組織中,有38例S-100A4蛋白表達陽性,其陽性率為74.51%\\(38/51\\),差異具有統計學意義\\(ｘ2=26.348,P<0.05 \\);在對腫瘤侵蝕深度為T1+T2的31例胃癌組織中,S-100A4蛋白表達的為4例,陽性率為12.90%\\(5/30\\),在對腫瘤侵蝕深度為T3+T4的51例胃癌組織中,有39例S-100A4蛋白表達陽性,其陽性率為76.47%\\(39/51\\),差異具有統計學意義\\(ｘ2=31.238,P<0.05\\);在臨床分期中,判定為Ⅰ+Ⅱ期的30例胃癌病例中有5例S-100A4蛋白的表達,陽性率為16.67%\\(5/30\\),Ⅰ+Ⅱ期的52例胃癌組織中38例陽性,陽性表達率73.08%\\(38/52\\),差異有統計學意義\\(ｘ2=24.273,P<0.05\\);在36例高中度分化的胃癌組織與46例低分化胃癌組織中,差異無統計學意義\\(P=0.696\\);在60例男性病例與22例女性病例中,差異無統計學意義\\(P=0.554\\);患者年齡<60歲的17例胃癌與患者年齡\\60歲的65例胃癌組織相比,差異也無統計學意義\\(P=01554\\);在腫瘤直徑<50 mm的27例胃癌與腫瘤直徑\\50 mm的55例胃癌組織相比,差異也無統計學意義\\(P=0.05\\)。

3、 討 論

目前,胃癌的全球發病率居惡性腫瘤首位;我國胃癌的死亡率居惡性腫瘤的第一位,90%以上為中晚期癌癥,術后5年生存率僅為30%~40%。S-100A4蛋白在多種腫瘤中表達升高,既往研究表明在50%~70%的胃癌病灶中可檢測到S-100A4蛋白表達,而正常胃黏膜很少表達。本文用S-P法檢測S-100A4的表達,發現胃癌組織中陽性率為52.4%,在正常胃黏膜組織中表達率為3.6%\\(P<0.05\\),證實了與本文研究一致,同時本文研究顯示在臨床分期為Ⅰ+Ⅱ期的早期胃癌組織中,S-100A4陽性率為16.67%\\(5/30\\),但在臨床分期為Ⅰ+Ⅱ期的晚期胃癌組織中,則有73.08%\\(38/52\\)的高表達。說明S-100A4表達升高可能與胃癌的浸潤、轉移有關。

近年來大量研究表明,S-100A4蛋白必須通過與其他癌基因的相互作用才能引起細胞惡變,進而引起腫瘤的發生,腫瘤抑制因子p53是一種轉錄因子,能夠調控多種基因的表達。Sherbet等和Grigoria等的研究發現S-100A4能夠與P53蛋白結合\\(主要是P53蛋白C終端的調控區\\),通過蛋白激酶C抑P53蛋白全長的磷酸化反應,從而使P53喪失細胞周期中G1/S限制點的檢測功能,使DNA已發生突變的細胞進入S期,使細胞不受G2/M限制點的檢測即進入M期,造成細胞的轉錄、翻譯發生異常,導致細胞過度分裂,使其發生惡變。本研究中S-100A4的表達與腫瘤細胞的分化程度無關,其差異可能與研究的樣本量偏小及取材有關,但是Ninomiya等的研究發現S-100A4的表達與腫瘤細胞的分化程度呈負相關,所以S-100A4蛋白表達水平與胃癌的分化程度的關系有待進一步探討。

S-100A4蛋白的表達隨浸潤深度、腫瘤大小及淋巴結轉移的增加而升高\\(P<0.05\\),這與Kimura等研究肺癌和Daｘies等研究膀胱癌組織中S-100A4蛋白表達的結果一致。

綜上所述,胃癌組織中S-100A4表達明顯高于正常組織,隨著腫瘤大小、浸潤深度、淋巴結轉移及臨床分期的增加陽性表達率明顯升高,說明S-100A4與腫瘤的發生、發展具有一定的相關性,但其詳細機制仍需進一步研究。這不僅對胃癌演變及判斷預后具有重要意義,也可作為新的生物標志物及治療胃癌浸潤轉移的潛在靶目標。